實驗室中所用的玻璃層析柱有兩種形式:
一是下部帶有活塞的玻璃管,活塞的芯最好是聚四氟乙烯制作的,這樣可以不涂真空油脂,以免污染產(chǎn)品。如果使用普通的玻璃活塞,則真空油脂要小心地涂薄涂勻。
另一種是將玻璃管下端拉細,套上一段彈性良好的管子。這段管子必須是不能被淋洗劑溶解的,普通橡皮管一般不可充作此用,因為橡皮易被氯仿、苯、THF等溶劑溶脹,而聚乙烯管子對大多數(shù)溶劑是惰性的,所以常常使用。用一只螺旋夾控制流速,此外,薄膜塑料柱因使用方便、節(jié)省淋洗劑、減少蒸發(fā)量等優(yōu)點,應用日趨廣泛。薄膜塑料柱總是以扁平成卷保存的,兩側常有很深的折痕。使用前需將裁取的一段薄膜管一端扎緊,另一端套在一段玻璃管上并用棉線扎緊。將這段玻璃管穿過一個單孔塞。然后將薄膜管放進一根又粗又長,下端拉細了的玻璃管內(nèi),使塞子塞緊大玻璃管的口。用水泵自大玻璃管下端抽氣,薄膜柱即因內(nèi)部壓強大于外部而自行展圓。待裝入吸附劑后在其下部扎幾個小孔即可使用。
層析柱的尺寸根據(jù)被分離物的量來確定,其直徑與高度之比則根據(jù)被分離混合物的分離難易而定,一般在1∶8到1∶50之間。柱身細長,分離效果好,但可分離的量小,且分離所需時間長;柱身短粗,分離效果較差,但一次可以分離較多的樣品,且所需時間短。如果待分離物各組分較難分離,宜選用細長的柱子,如果要處理大量的較易分離的或對分離純度要求較低的混合物,則可選用粗而短的柱子。最常使用的層析柱,直徑與長度之比在1∶8到1∶15之間。